Taq DNA Polymerase Taq DNA 聚合酶
简介： 本制品是94KD的耐热的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus
DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后，
分离提取而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。
该酶反应需Mg2+参与，它以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向
3’末端形成双链DNA。该酶同时具有5’→3’核酸外切酶活
性。该产品主要用于DNA的PCR扩增，DNA测序，可以很好地扩
增1kb地DNA片段。该产品主要包括酶、10×反应缓冲液与氯化
镁溶液。
单位定义：在74℃，30分钟内，能够吸收10mmol dNTP，形
成酸性不溶性物质所需的酶量为一个活性单位。
酶储存缓冲液B:
50％甘油，20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl，1mM
DTT，0.1mM EDTA，0.5％Tween20和0.5％Nonidet P40。
配套试剂：
1．10×反应缓冲液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase
10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl,
100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100.
建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。
2.反应中镁离子在混合物中的最终浓度由
使用者根据自己需要决定。建议使用浓度在1－4毫摩尔。
注：使用前完全溶解氯化镁溶液并充分振荡几秒钟。
3．10反应缓冲液(含MgCl2)：包含 15mM MgCl2，
500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton
X-100. 建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫
摩尔。
质量控制：
1. 活性:大于5单位/微升。
2. Overdigest (OD) 检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克
λDNA在74℃下反应16小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检
出降解的λDNA。
3. 切口酶检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克超螺旋质
粒DNA在74℃下反应4小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检
出切口酶或线性DNA带。
4. 热稳定性检测: 94℃时，每微升5单位Taq DNA 聚合酶在
缓冲液中的半衰期长于1小时。
注意：反复冻融可能会引起氯化镁沉淀，将缓冲液在90℃加热
10分钟能恢复溶液的均一性。
储存条件：−20℃